科普 | 帶你走進(jìn)牛血清白蛋白(BSA)的世界
發(fā)布時間:2022-11-10 22:27:47來源:儀器信息網(wǎng)
1.如何選擇合適的BSA
由于牛血清白蛋白(BSA)具有多種產(chǎn)品樣式,可滿足不同種的應(yīng)用。目前網(wǎng)上的信息大多模棱兩可,市場上有低脂肪酸級、低內(nèi)毒素級、微生物級、試劑級、診斷分析級等多種BSA,因此如何選擇合適的BSA產(chǎn)品是很重要的前提。
1.微生物級別
2.低內(nèi)毒素級別
3.低IgG級別
4.低脂肪酸級別
5.標(biāo)準(zhǔn)級別
除了多種產(chǎn)品類型外,BSA的生產(chǎn)工藝更是被劃分為3種:Cohn分餾法、熱休克法和色譜層析法。
6.BSA的應(yīng)用
牛血清白蛋白(BSA)在生化實驗中有廣泛的應(yīng)用,例如:
1、在PCR體系中有助于Taq酶的穩(wěn)定性及活性,可以提高PCR的效率。
2、ELISA中也常常用到,比如封閉液,樣本稀釋液,酶結(jié)合物稀釋液都可以用BSA。
3、生化研究,遺傳工程和藥物研究。
4、血液中的白蛋白主要起維持滲透壓作用、PH緩沖作用、載體作用和營養(yǎng)作用。
5、在動物細(xì)胞無血清培養(yǎng)中,添加白蛋白可起到生理和機(jī)械保護(hù)作用和載體作用。除了以上提及的BSA應(yīng)用方向外,當(dāng)然還有其他實驗中運(yùn)用到,不妨來看看~
應(yīng)用1:瘧原蟲培養(yǎng)
體外連續(xù)培養(yǎng)的瘧原蟲是研究瘧原蟲的重要工具,然而用于維持瘧原蟲生長所必需的新鮮人血清卻很難獲得。研究人員發(fā)現(xiàn),在惡性瘧原蟲培養(yǎng)基中加入含脂豐富的牛血清白蛋白可有效替代人血清,適用于紅細(xì)胞內(nèi)期瘧原蟲的體外連續(xù)培養(yǎng)[1]?;?qū)⑷搜迮c含脂豐富的牛血清白蛋白按一定比例混合加入瘧原蟲培養(yǎng)基中,瘧原蟲可達(dá)到與全人血清培養(yǎng)相似的生長狀態(tài),這樣就減少了對新鮮人血清的完全依賴[2]。
結(jié)論:與其它品牌的高脂牛血清白蛋白相比,MP Biomedicals色譜層析法的牛血清白蛋白(除低脂肪酸級以外)的總脂含量大約是它們的總脂含量的2.5倍,因此廣泛應(yīng)用于瘧原蟲的體外培養(yǎng)[3]。高脂含量的牛血清白蛋白不僅有利于細(xì)胞培養(yǎng),對于研究人員,也可減少膽固醇濃縮物或其它添加劑的使用,能顯著增加細(xì)胞滴度。
應(yīng)用2:肝癌的研究
高濃度的游離脂肪酸(Free fatty Acids,F(xiàn)FAs)和腫瘤壞死因子(TNF-α)會改變細(xì)胞活動過程,引起脂毒性。研究人員發(fā)現(xiàn),細(xì)胞內(nèi)的脂質(zhì)累積會降低游離飽和脂肪酸的脂毒性。因此,為了開發(fā)出有效治療復(fù)雜及多種影響因素引起的疾病的治療方法,尋找能調(diào)節(jié)多個細(xì)胞過程的基因,研究人員建立了一個模型,將人肝癌細(xì)胞(HepG2)置于高濃度FFA和TNF-α的生理環(huán)境中。整個實驗分為對照組,BSA組,棕櫚酸酯組,油酸酯組及亞油酸酯組,然后檢測加入不同F(xiàn)FA的細(xì)胞中的甘油三酯(TG)累積,毒性和基因應(yīng)答情況[4]。
結(jié)論:研究結(jié)果發(fā)現(xiàn)一些參與調(diào)節(jié)脂質(zhì)累積及細(xì)胞毒性的基因,這些參與多個細(xì)胞過程調(diào)控的基因有望成為對抗復(fù)雜疾病的理想候選作用靶點。