核心摘要：

　　1、病理檢查的發(fā)現(xiàn)：死后檢查可見淋巴結(jié)腫大、出血和水腫，尤其是胃、縱隔淋巴結(jié)。在一些豬，這種損害是觀察到在大多數(shù)固有淋巴結(jié)。其他病變包括扁桃體暗色和水腫，有時伴有膿皰或出血，脾出血，腎皮質(zhì)很少有點狀出血，膀胱壁(一只豬)瘀斑，結(jié)腸粘膜最尾部出血。在一些豬中，觀察到含有腹水和白蘭地液體狀態(tài)的心包積液。有時，在尸檢的過程中持續(xù)出血，偶爾在腹腔中發(fā)現(xiàn)大量的血液。

　　2、傳播依賴于接種豬的分泌物或排泄物，但傳染效率遠沒有血液來得快。這項研究的結(jié)果與血液是一種非常有效的感染源的觀點一致，因為在感染后期采集的血液中病毒滴度往往高于鼻腔和直腸拭子中觀察到的病毒。并且，基于我們的發(fā)現(xiàn)，感染病毒的分泌通過鼻腔口腔或者直腸拭子的檢測表明似乎是間歇性或不存在(例如在口腔拭子中)，不會導致環(huán)境中高水平的病毒含量。接觸的效率決定的感染的速度。

　　3、在豬(1米)上方1米做空氣收集發(fā)現(xiàn)病毒，且能感染一米過道對面的豬，證明通過空氣的傳播是ASFV在豬場內(nèi)傳播的一個非常重要的模式。從空氣傳播到非瘟癥狀出現(xiàn)在研究a中用了12天左右，在研究b中用了15天左右。實際上在空氣被擾動的狀態(tài)下，空氣隔欄傳染的時間會比這短得多。

　　4、qPCR方法對全血具有較高的敏感性，其中的病毒DNA載量較高。所以用這種方法，直腸試子和EDTA血試子能更早的檢測出病毒DNA(直腸有時會出血)，比口鼻試子早2天以上。

實驗內(nèi)容：

　　丹麥科學家在封閉的豬舍內(nèi)做了兩個有關非洲豬瘟在舍內(nèi)豬群傳播的模擬試驗，該試驗證實非洲豬瘟病毒(ASFV)在豬舍內(nèi)是可以通過空氣近距離傳染的。在豬場內(nèi)部空氣傳播是一種非常重要的傳播方式。這兩個試驗為我們揭示了ASF在豬欄內(nèi)以及相鄰的豬欄間，還有通過空氣傳染給同舍內(nèi)其它的豬的漸進過程。我們現(xiàn)在把這個試驗過程以及結(jié)果介紹給大家，讓大家對舍內(nèi)的感染過程有個充分的認識。

　　試驗用了兩個豬舍五個豬欄，一個豬舍的一欄豬作為對照，另外一個豬舍用來做感染試驗。接種后的第二天，即感染后(post infection day，PID)1天健康豬從第4欄移入第1欄，用來做欄內(nèi)接觸感染。從感染0天，另一欄健康豬飼養(yǎng)在第2欄，第1欄，用來做欄間接觸感染。這些豬被允許鼻子通過欄桿接觸第1欄，這些欄桿把第1欄和第2欄隔開。第3欄的豬通過第1和第2號欄之間走廊(1米寬)分隔開。第3欄中的豬不允許和第1、2欄有任何直接接觸，只能通過空氣病毒傳播。為了避免經(jīng)由設備和/或人員間接傳輸病毒，這些豬都使用單獨的設備。

　　黑點，代表欄1接種病毒的豬，接種后第一天會有健康豬(白色方塊)轉(zhuǎn)入此欄做欄內(nèi)直接接觸感染過程試驗;

　　白色方塊，代表黑點豬接種后轉(zhuǎn)入的健康豬;

　　黑菱形，代表與欄1能間接接觸的的隔壁欄的健康豬，它們與欄1之間能夠通過欄桿直接接互相接觸;

　　白點和灰色點，代表欄3中的空氣接觸的健康豬，這些健康豬與對面的欄1欄內(nèi)接觸豬和欄2的隔欄欄間接觸豬只有一米過道的間隔，豬只能通過空氣互相接觸而不能直接接觸也不能通過分泌物接觸，更沒法通過血液接觸。

　　欄4開始用來暫時裝健康豬，在欄黑點豬接種后，就把欄4的豬移入欄1。

　　欄5是在另外的一個封閉豬舍內(nèi)的健康豬，作為對照組，在整個試驗過程中安然無恙。

　　試驗開始后每天記錄每頭豬的臨床評分和直腸溫度。每天的總臨床評分(CS)是根據(jù)與Pietschmann等人所描述的系統(tǒng)稍作修改的系統(tǒng)計算的。(2015年)。臨床總評分計算為10個類別的得分之和(表1)，最大臨床總得分為42分。存在臨床癥狀被定義為臨床評分CS>3。在不同的時刻(包括安樂死方式處死后)采集了未加抗凝劑的不穩(wěn)定血液、加EDTA穩(wěn)定血液(EDTA血液)和口拭子、鼻拭子和直腸拭子。

　　空氣樣本的收集方式為：每個樣本在5分鐘內(nèi)收集，每個樣本取樣約1升空氣。空氣樣本是在欄地板的正上方且豬體高上方1米處收集的。此外，在接種之前和接種后2、5、8和11天，從欄1和欄3之間的走廊和對照組的豬舍收集了空氣樣本。此外，從病豬鼻約1-2厘米處采集了樣本(豬呼吸的空氣)。

　　采用定量實時聚合酶鏈反應(qPCR)的ASFVDNA檢測從EDTA血、血清、鼻拭子、口腔拭子和直腸拭子中提取DNA。

　　試驗發(fā)現(xiàn)，在這些研究過程中，對照組沒有觀察到感染的臨床跡象，也沒有在血液樣本或從對照豬獲得的鼻腔、口腔或直腸拭子中檢測到ASFV DNA。

　　平均來講，欄內(nèi)直接接觸感染豬(欄1)會在隨后的 8.3 ± 1.5天, 欄間的間接接觸感染豬(欄2)在10.0 ± 0.8天和空氣接觸豬(欄3)12.8 ± 1.0天，也分別表現(xiàn)癥狀。臨床癥狀出現(xiàn)時間與血清感染病毒或病毒DNA檢測時間無顯著性差異(P>0.05)。EDTA 血樣通常在相應血清的前一天進行qPCR檢測呈陽性。病毒血清DNA的水平一直比那些EDTA血中的低。

　　在此研究中，鼻腔內(nèi)接種后觀察到的潛伏期是6 ± 2.7天(研究a)和6.3 ± 1.3天(研究b)。在出現(xiàn)病毒血癥前僅靠在扁桃體及咽后淋巴結(jié)最初的復制的時候，豬向體外排毒的可能性也是不能排除的。這項研究的結(jié)果與血液是一種非常有效的感染源，因為在感染后期采集的血液中病毒滴度往往高于鼻腔和直腸拭子中觀察到的病毒。在所有的豬中，開始感染前的表觀潛伏期/時間在EDTA血中要比相應的血清短。EDTA血中比血清中能更早的檢測出來病毒可能是由于病毒和血液的細胞部分之間的關聯(lián)，用加了穩(wěn)定劑的全血(EDTA血)檢測比用血清檢測DNA更準。

　　在接種后6天在空氣接觸豬鼻拭子中檢測到低水平的病毒DNA，第2天在欄 3的空氣樣本中檢測到病毒DNA。然而，直到檢測后的5-6天這些豬才開始發(fā)病。病毒成功地通過空氣感染同舍的豬，證實了從病豬身上流出的傳染性病毒可以通過空氣在短距離內(nèi)傳播。通過空氣的傳播是ASFV在豬場內(nèi)傳播的一個非常重要的模式。

兩個試驗的結(jié)果如下表：

　　ASF的傳播研究結(jié)果：估計接種豬的平均潛伏期和潛伏期，估計的臨床癥狀開始(臨床評分>3被認為高于閾值)的時間和接觸豬群的傳染性開始的時間。

　　研究a

　　研究b

　　接種后平均天數(shù)(±標準差);§暴露天數(shù)(±標準差)的平均天數(shù);#qPCR結(jié)果;+病毒分離結(jié)果;CS代表臨床評分，CS>3即認為感染的臨床癥狀出現(xiàn)。

　　以上兩個試驗的數(shù)據(jù)都說明了圈舍內(nèi)非洲豬瘟是可以通過空氣傳播的，但比欄內(nèi)的直接接觸的感染要慢得多，最快的感染方式是直接接種，血液是最有效的傳播方式。欄間的感染并不比欄內(nèi)的直接感染慢多少，一般在出現(xiàn)癥狀之前血清分離病毒和試子檢測全血檢測都能提前檢測出來，但臨床癥狀的出現(xiàn)在大多數(shù)情況下要比DNA檢測置后。
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